Sl-miR482在番茄果实中的表达分析及STTM沉默载体的构建

作者：莫显兰; 史列琴; 陆秋利; 王小敏^*; 任振新^*

来源：生物技术通报, 2019, 35(12): 50-56.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0566

• Sl-miR482
• STTM
• 果实成熟与软化
• 调控机制
• 载体构建

研究番茄Sl-miR482在果实成熟阶段特殊的表达模式,对其功能进行生物信息学分析并构建STTM沉默载体,为深入阐明Sl-miR482在番茄果实成熟软化中的作用机制奠定基础。采用定量PCR进行基因表达检测;利用启动子分析软件和靶基因预测网站进行生物信息学分析;利用PCR扩增及酶切、连接反应进行STTM载体构建,并转化农杆菌。Sl-miR482在开花期表达量逐渐上升,到未成熟绿期表达量达到最高峰,随后逐渐下降。进一步生物信息学分析结果表明,Sl-miR482启动子中存在乙烯应答元件等。靶基因预测网站结果显示,番茄果胶裂解酶Sl-PL13为Sl-miR482的靶基因;基因表达分析结果表明,Sl-PL13与SlmiR482表达量在果实成熟不同阶段呈现此消彼长的关系。利用PCR扩增及酶切连接方法,成功构建STTM482沉默载体并转化农杆菌。Sl-miR482在果实成熟软化过程中发挥重要作用。

• 单位
  玉林师范学院