利用大肠杆菌tyrB-aspA基因串联表达制备L-苯丙氨酸

作者：范长胜; 李欣; 高山峨; 王海蛟; 焦晔; 王建刚; 梁国新; 陶菊红

来源：食品与发酵工业, 2005, (07): 1-4.

• aspA
• tyrB
• 天冬氨酸酶
• 芳香氨基酸转氨酶
• 苯丙氨酸

从大肠杆菌K12菌株中获得tyrB和aspA基因,将2个基因串联并克隆到pλPR质粒上,然后转化到E·coliP2392菌株进行表达。相应酶活力和氨基酸产量检测结果表明,单基因表达和双串联基因串联表达菌株的酶活性成倍提高,与原始菌株相比,AspA活力分别提高243%与239%,TyrB活力分别提高到247%和236%。以基因双串联表达菌株E·coliPBA的菌体悬浮液为酶原,以铵盐、反丁烯二酸和苯丙酮酸为酶转化底物,反应3h后,苯丙酮酸转化苯丙氨酸的效率为93%,苯丙氨酸产率达到0·6g/(g·h)(细胞),是对照菌株的4·7倍。

• 单位
  复旦大学; 生命科学学院