高有机溶剂耐受性的苯并(a)芘单克隆抗体制备及其免疫反应特性研究

作者：孙清; 黄刚锋; 史亚利^*; 时国庆^*; 蔡亚岐

来源：食品安全质量检测学报, 2022, 13(18): 5895-5901.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2022.18.036

• 苯并(a)芘
• 单克隆抗体
• 有机溶剂耐受
• 酶联免疫吸附测定

目的 制备适应油脂样品中苯并(a)芘[benzo(a)pyrene, BaP]检测需求的抗BaP单克隆抗体。方法 利用杂交瘤单克隆抗体技术制备抗BaP的抗体,在抗体筛选过程中使用高浓度的有机溶剂(50%甲醇)来选择具有较高有机溶剂耐受能力的抗体,并利用间接竞争酶联免疫吸附法考察抗体的免疫反应特性。结果 筛选获得一株对有机溶剂有较高耐受能力的、稳定分泌BaP单克隆抗体的细胞株2H10,该抗体为IgG1亚型,可耐受高浓度的甲醇、丙酮、二甲亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)和二甲基甲酰胺(dimethylformamide, DMF)。60%甲醇和60%DMSO作为样品稀释液时,抗体对BaP的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)分别为81.4和24.5 ng/mL,以60%DMSO作为样品稀释液,可以降低BaP抗体对其他多环芳烃化合物的交叉反应率。结论 本研究获得高特异性的BaP人工抗原及高有机溶剂耐受性的抗BaP单克隆抗体。

• 单位
  环境化学与生态毒理学国家重点实验室; 高等研究院; 中国科学院生态环境研究中心; 生物工程学院; 北京科技大学; 中国科学院大学