骨桥蛋白介导PI3K/AKT通路促进非小细胞肺癌顺铂耐药

作者：刘迪; 龙谦^*; 罗猛; 胡剑; 陈臣; 裴登科

来源：华中科技大学学报(医学版), 2020, 49(01): 17-23.

• 非小细胞肺癌
• 骨桥蛋白
• 顺铂
• 耐药
• PI3K/AKT
• ERK1/2
• ERCC1

目的探讨骨桥蛋白(OPN)与非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂耐药的相关性及其机制。方法选用NSCLC A549细胞系,构建OPN沉默细胞及OPN过表达细胞;肺癌细胞对顺铂的敏感性利用MTT和流式细胞仪分析;采用Western blot检测顺铂处理前后各组细胞PI3K和ERK1/2蛋白表达水平;分别用实时荧光定量PCR和Western blot检测顺铂处理前后各组细胞ERCC1的mRNA和蛋白表达水平。结果成功构建OPN过表达及OPN沉默载体。经顺铂处理后,OPN过表达组的细胞增殖活性明显高于对照组,OPN沉默组的细胞增殖活性明显低于对照组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。OPN过表达组的细胞凋亡明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。OPN过表达组的PI3K、p-PI3K蛋白表达水平升高,OPN沉默组的PI3K、p-PI3K蛋白表达水平下降,顺铂处理后OPN过表达组的PI3K、p-PI3K蛋白表达水平较OPN沉默组高,而ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达水平则无明显差异。加入ERK抑制剂U0126,OPN过表达组的细胞增殖活性,OPN沉默组的细胞增殖活性与对照组无明显差异。OPN过表达组的细胞凋亡,OPN沉默组的细胞凋亡与对照组无明显差异。加入PI3K抑制剂LY294002后,对照+LY294002+顺铂组增殖率较对照组低,对照+LY294002+顺铂组、shRNA-OPN+LY294002+顺铂组凋亡率较对照组高,差异具有统计学意义(均P<0.05)。OPN过表达组ERCC1的mRNA表达较对照组明显升高,OPN沉默组ERCC1 mRNA的表达与对照组相比明显降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。OPN过表达组ERCC1的蛋白表达高于对照组,OPN沉默组ERCC1的蛋白表达低于对照组。结论 OPN过表达可促进NSCLC对顺铂耐药。OPN促进NSCLC对顺铂耐药的机制可能是通过激活PI3K/AKT信号通路,而与ERK1/2通路活化无明显相关。OPN过表达可上调ERCC1,OPN可能通过PI3K/AKT信号通路上调ERCC1从而促进NSCLC对顺铂的耐药。

• 单位
  贵州省人民医院