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摘要
目的研究当归挥发油(EOAS)对缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的影响。方法将高分化PC12细胞分为空白组、模型组、对照组及当大中小3个剂量实验组。除空白组外,其余各组用含10 mmol·L-1连二亚硫酸钠(Na2S2O4)的无糖培养基缺氧缺糖损伤1 h,大中小3个剂量实验组加入终浓度分别为25.00,12.50,6.25μg·m L-1EOAS,对照组加入10μmol·L-1依达拉奉,复氧48 h。用MTT比色法检测当归挥发油对细胞增殖的影响,以试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,用流式细胞仪检测细胞凋亡,以AO/PI免疫荧光染色观察凋亡细胞形态,以比色法检测细胞caspase-3的活性,以免疫印迹法检测p-ERK1/2蛋白的表达。结果与空白组相比,模型组细胞存活率降至(67.4±0.10)%,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,对照组和大剂量实验组的细胞存活率分别升至(86.2±0.10)%,(94.5±0.05)%,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组细胞LDH活性、MDA含量分别升高至(912.53±16.71)U·L-1及(9.05±0.25)μmol·L-1;而SOD水平降至(12.53±0.29)U·m L-1,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与模型组相比,大剂量实验组的LDH活性降低至(565.61±11.72)U·L-1,而SOD水平升高至(12.53±0.29)U·m L-1,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,大中2个剂量实验组MDA含量分别降至(3.32±0.68),(5.79±0.68)μmol·L-1,差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组与大中小3个剂量实验组细胞的光密度(A)分别为0.75±0.06,0.10±0.02,0.16±0.03及0.49±0.04,与模型组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与空白组相比,模型组细胞凋亡率为(31.17±2.44)%,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,大中2个剂量组细胞凋亡率分别为(4.57±0.32)%,(5.93±0.81)%,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与模型组相比,大剂量实验组能够明显促进细胞p-ERK1/2蛋白的表达(P<0.01)。结论 EOAS通过激活ERK信号通路抑制拟缺血再灌注神经细胞凋亡。
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