S100A4与p53在活细胞内相互作用研究

作者：刘臻; 孟莹; 王慧君; Philip S.Rudland; Roger Barraclough; 张述^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2020, 27(06): 431-437.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2020.06.03

• 荧光共振能量转移
• 相互作用
• 肿瘤转移
• p53
• S100A4

目的体外研究发现S100A4蛋白可与p53蛋白结合,但至今尚不清楚S100A4与p53蛋白能否在活细胞内发生相互作用。本研究旨在确定S100A4与p53在活细胞内的相互作用。方法采用光学生物传感器体外检测S100A4蛋白与p53蛋白的结合能力。应用激光共聚焦显微镜的荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术检测Hela细胞(人宫颈癌细胞株)内S100A4与p53蛋白的相互作用。结果光学生物传感器体外检测发现,野生型S100A4蛋白与p53蛋白结合能力强,对照组突变型S100A4蛋白则失去与p53蛋白的结合能力。采用FRET技术发现,表达CFP-S100A4和p53-YFP融合蛋白的Hela细胞中,细胞核内p53-YFP的荧光强度衰减后,CFP-S100A4的荧光强度增强,发生FRET;而细胞质中没有发生FRET。作为对照,表达突变CFP-mS100A4-C和p53-YFP融合蛋白,或表达S100A4和YFP的Hela细胞内没有发生FRET,表明S100A4和p53之间的相互作用发生在活细胞的细胞核中。结论活细胞内S100A4可直接与细胞核中的p53相互作用,这可能是S100A4蛋白在体内发挥生物学作用的分子基础,提示阻断S100A4的钙结合位点可能是潜在的抗肿瘤转移作用靶点。

• 单位
  山东省医学科学院; 山东省肿瘤防治研究院; 生命科学学院; 山东第一医科大学; 山东省肿瘤医院; 济南大学