RhoA/ROCK信号通路在缺氧/复氧诱导心肌H9C2细胞损伤中调控机制

作者：林显文; 乔国艳

来源：中国老年学杂志, 2022, 42(18): 4558-4563.

• 缺氧/复氧
• 心肌细胞
• 凋亡
• 氧化应激

目的 探讨Ras同源基因家族蛋白(Rho)A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路在缺氧诱导心肌H9C2细胞损伤中的调控作用机制。方法 将心肌H9C2细胞分成正常组、模型组、对照组(转染空载病毒Ad5-EGFP)、RhoA-siRNA组(转染RhoA-siRNA),模型组、对照组、RhoA-siRNA组细胞构建缺氧/复氧模型，以正常H9C2细胞作为正常组。使用倒置荧光显微镜观察细胞形态改变、DCFH-DA染色检测活性氧(ROS)水平、JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位的变化、Hoechst 33258染色检测细胞凋亡的变化、彗星实验检测DNA损伤的程度。Western印迹检测各组心肌细胞中B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl相关X蛋白(Bax)、RhoA、ROCK1及ROCK1的表达。结果 模型组H9C2细胞绿色荧光强度、线粒体膜电位、olwe尾距明显强于正常组(P<0.05);RhoA-siRNA组H9C2细胞绿色荧光强度、线粒体膜电位、olwe尾距明显弱于模型组(P<0.05),对照组与模型组差异不明显(P>0.05),模型组细胞凋亡率、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK2的表达水平明显高于正常组(P<0.05),Bcl-2的表达水平明显降于正常组(P<0.05);RhoA-siRNA组细胞凋亡率、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK2的表达水平明显低于模型组(P<0.05),Bcl-2的表达水平明显高于模型组(P<0.05)。结论 抑制RhoA/ROCK通路能明显降低缺氧/复氧心肌细胞的凋亡率，可能改善细胞线粒体损伤，降低氧化应激水平。

• 单位
  成飞医院; 神经内科