RUNX1在鼻息肉黏膜上皮细胞凋亡中的作用研究

作者：裴银银; 黄丹怡; 张婷; 张薇; 张洁; 张少聪; 类云; 周勇; 程雷^*; 陈静^*

来源：中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2021, 56(12): 1328-1335.

DOI：10.3760/cma.j.cn115330-20210125-00036

• Runt相关转录因子1
• 鼻息肉
• 原代人鼻黏膜上皮细胞
• 肿瘤坏死因子α
• 凋亡

目的探究Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1, RUNX1)在鼻息肉(nasal polyps, NPs)组织中的表达差异, 并分析RUNX1在NPs原代人鼻黏膜上皮细胞(primary human nasal epithelial cells, pHNECs)凋亡中的作用及调控机制。方法以免疫蛋白印迹(WB)和免疫组织化学染色检测组织层面RUNX1的表达水平。采用肿瘤坏死因子α(TNF-α, 20 ng/ml)体外诱导pHNECs发生凋亡, 进行Hoechst染核观察细胞凋亡。随后, 通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和WB检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤基因2(B-cell lymphoma-2, BCL-2);BCL2相关蛋白质X(BCL2-associated X, BAX);含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3, Caspase-3)的表达, 评估凋亡水平。将sh-RUNX1-6质粒转染至pHNECs凋亡模型, 用WB和流式细胞术评估RUNX1沉默对凋亡的影响。通过SPSS 19.0软件和GraphPad Prism 5软件进行统计学分析。结果 NPs组织中RUNX1的表达明显高于正常下鼻甲组织, 差异具有统计学意义(0.274±0.042比0.110±0.027, t=9.675, P<0.05)。与下鼻甲组织相比, NPs中BAX和Caspase-3高表达, 而BCL-2低表达, 差异具有统计学意义(BAX 0.346±0.032比0.302±0.037, Caspase-3 0.228±0.061比0.158±0.065, BCL-2 0.090±0.047比0.276±0.057, t值分别为2.680、2.361、7.575, P值均<0.05)。TNF-α诱导后pHNECs中RUNX1的蛋白、mRNA表达和凋亡水平均呈时间依赖性升高, 差异具有统计学意义(P值均<0.05)。sh-RUNX1-6质粒转染能够下调TNF-α刺激下pHNECs中RUNX1的表达。沉默TNF-α刺激下pHNECs中的RUNX1后, 细胞中BAX和Caspase-3的蛋白水平降低, 而BCL-2表达增高, 细胞凋亡率降低, 差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论 RUNX1在NPs组织中高表达, 沉默RUNX1能够抑制TNF-α诱导的pHNECs凋亡, 从而减轻细胞炎症损伤。

• 单位
  南京医科大学; 南通大学附属医院; 南京医科大学第一附属医院; 南通大学