副溶血性弧菌外膜蛋白VP1008的原核表达及诱导条件的优化

作者：袁倩云; 梁夏夏; 刘蕾; 郭珊珊; 王文彬^*

来源：化学与生物工程, 2021, 38(09): 50-53.

• 副溶血性弧菌
• 外膜蛋白
• 原核表达
• 条件优化

为进一步确定致病性副溶血性弧菌外膜蛋白VP1008的特异性结构和功能,采用PCR扩增出外膜蛋白VP1008的目的基因片段,构建重组表达质粒pET-28a(+)-VP1008,转化到大肠杆菌BL21并经IPTG诱导表达,实现重组外膜蛋白VP1008的高效表达,考察IPTG浓度、起始菌液浓度(OD600)、诱导温度、诱导时间对蛋白表达量的影响。确定重组外膜蛋白VP1008的最优诱导条件为:IPTG浓度1.0 mmol·L-1、OD6000.6、诱导温度37℃、诱导时间12 h。该研究为制备VP1008多克隆抗体,研究VP1008的结构、功能及免疫原性奠定了基础。