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摘要
核纤层蛋白B1 (nuclear lamina protein B1,LMNB1)高表达于肝癌组织中，通过敲低LMNB1探讨其对肝癌细胞增殖的影响及其机制。利用siRNA在肝癌细胞中敲低LMNB1,Western blotting检测敲低效果，使用端粒重复序列扩增法(telomeric repeat amplification protocol assay,TRAP)检测其端粒酶活性变化。利用实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测其端粒长度变化。并通过CCK-8、克隆形成、Transwell、划痕实验检测其生长，侵袭和迁移能力变化。利用慢病毒系统构建稳定敲低LMNB1的HepG2细胞，检测其端粒长度及端粒酶活性变化，采用SA-β-gal衰老染色检测细胞衰老情况，通过裸鼠皮下成瘤实验及对肿瘤后续的组化染色，SA-β-gal衰老染色，端粒荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测其对成瘤性的影响。最后利用生物信息分析的方法寻找LMNB1在临床肝癌组织中的表达情况，及其与临床分期、病人生存期的关系。HepG2和Hep3B中敲低LMNB1后端粒酶活性显著降低，细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低，细胞和裸鼠成瘤实验证明稳定敲低LMNB1后端粒酶活性降低的同时端粒长度缩短，细胞发生衰老，此外细胞成瘤性降低，Ki-67表达降低，生物信息分析结果显示，LMNB1高表达于肝癌组织，且与肿瘤分期和患者生存相关。LMNB1在肝癌细胞中过表达，其有望成为评估肝癌患者临床预后的指标和精准治疗的靶点。
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