大黄素抑制Akt/mTOR通路抗肾小管上皮细胞纤维化的作用研究

作者：窦芳; 丁一; 楚建杰; 李韦韦; 张伟; 宁泽琼; 赵先; 王婧雯; 文爱东^*

来源：中国药师, 2018, 21(10): 1707-1711.

• 大黄素
• 纤维化
• 人肾小管上皮细胞
• Akt/mTOR
• 自噬

目的:探讨大黄素(EM)在转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化相关蛋白表达的机制。方法:HK-2细胞随机分为正常对照组、TGF-β1刺激的模型对照组和大黄素(TGF-β1+EM)组。采用ELISA法检测培养细胞上清液中CollageⅠ和Fibronectin的含量。TGF-β1刺激HK-2细胞24 h后收集细胞用于免疫荧光、免疫印迹Western Blot和实时荧光定量PCR(RT-PCR)分析。Western Blot印迹法分别检测Akt/mTOR通路蛋白PI3K、p-Akt和mTOR的表达; RTPCR法分别检测Akt/mTOR通路蛋白PI3K、p-Akt和mTOR mRNA的表达;免疫荧光检测PI3K在HK-2细胞模型中的表达。结果:与模型对照组相比,大黄素组细胞培养液上清中CollageⅠ和Fibronectin的含量明显减少(P <0. 05);抑制PI3K蛋白表达水平增加,降低其下游p-Akt蛋白表达,进而降低下游mTOR蛋白表达,差异有统计学意义(P <0. 05); PI3K、p-Akt和mTOR mRNA的表达水平降低,差异有统计学意义(P <0. 05); PI3K荧光表达减少。结论:大黄素干预TGF-β1诱导的HK-2细胞纤维化模型后,可以通过抑制自噬经典Akt/mTOR通路,对细胞损伤有缓解作用,为进一步探索其机制奠定基础。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学