不同自体血清对体外培养小鼠骨髓基质细胞的影响

作者：王宵; 黄国彪; 陈俊; 何俊华; 薄华本^*

来源：广东药学院学报, 2018, 34(05): 618-622.

DOI：10.16809/j.cnki.2096-3653.2018062801

• 小鼠
• 血清
• 骨髓基质细胞
• 灭活
• MTT检测

目的探讨小鼠自体血清的制备、处理方法和自体血清的最大添加量。方法制备10%血浆、10%血清和空白组血清来培养小鼠原代骨髓细胞,倒置荧光显微镜观察细胞形态及生长状态,MTT检测细胞活力;灭活的10%血清与未灭活的10%血清和空白组血清来培养原代骨髓细胞,MTT检测细胞活力;0%、5%、10%、15%、20%小鼠血清分别培养原代骨髓细胞,MTT检测细胞活力;将小鼠血清冻干,用IMDM培养基重悬血清的冻干粉,配制终浓度为0%、5%、10%、15%、20%的冻干粉溶液,培养原代骨髓细胞,MTT检测细胞活力。结果骨髓基质细胞体外培养3 d后,血清组的细胞吸光度值(0.497±0.009)显著高于血浆组(0.076±0.003),P<0.01;灭活组的细胞吸光度值(0.503±0.013)显著高于未灭活组(0.317±0.014),P<0.01;血清直接加入细胞时,5%组细胞生长状态最好,血清浓度的增加会影响细胞状态。经过冻干后,血清添加量可增加到20%。结论不加抗凝剂并将血清灭活为最佳制备自体血清的方法; 5%的小鼠血清为体外培养骨髓基质细胞的最佳血清浓度;将小鼠血清冻干,体外培养骨髓基质细胞的血清浓度增加至20%。

• 单位
  广东药科大学