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摘要
目的:探讨原花青素抑制缺氧胰腺癌PANC-1细胞增殖的作用及机制。方法:通过GEPIA网站预测SIRT3与HIF-1α基因在胰腺癌中的表达及其相关性;采用厌氧培养袋物理诱导法模拟PANC-1细胞体内缺氧环境,分为常氧对照组、模型组及原花青素低(15μg/mL)、中(30μg/mL)、高(60μg/mL)浓度组;CCK-8法检测不同浓度原花青素对PANC-1细胞活力的影响;倒置荧光显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平;采用DCFH-DA荧光探针检测细胞中活性氧(ROS)水平;采用生化试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和总抗氧化能力(T-AOC);Western Blot检测癌细胞中SIRT3、HIF-1α蛋白表达。结果:GEPIA数据库预测SIRT3的表达在胰腺癌中具有上调趋势,而HIF-1α表达显著上调且两者呈正相关;在缺氧条件下,CCK-8实验表明原花青素可显著抑制PANC-1细胞的活性;原位荧光检测表明模型组细胞中ROS水平显著升高且未见明显凋亡,原花青素能逆转细胞中ROS水平并诱导凋亡;抗氧化活性检测显示模型组细胞中SOD活性显著降低而T-AOC显著升高,原花青素则以浓度依赖性提高PANC-1细胞中SOD活性及T-AOC;Western Blot结果显示模型组SIRT3表达无明显改变,HIF-1α表达显著上调,原花青素能显著下调PANC-1细胞中SIRT3、HIF-1α蛋白表达。结论:原花青素可抑制胰腺癌细胞系PANC-1增殖,其机制可能与抑制ROS介导的SIRT3/HIF-1α信号通路有关。
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