miR-452-5p调控YTHDF2肝细胞癌细胞凋亡和铁死亡的机制研究

作者：王雪梅

来源：河北医药, 2022, 44(23): 3544-3553.

• miR-452-5p
• 肝细胞癌
• YTHDF2
• 凋亡
• 铁死亡

目的 探究miR-452-5p、YTH结构域家族成员2(YTH domain family, member 2,YTHDF2)调控肝细胞癌细胞凋亡、铁死亡的作用及其机制。方法 运用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)法检测L02、SMMC-7721、HepG2、Huh7、Hep3B细胞中miR-452-5p、YTHDF2的表达；脂质体法将anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、anti-miR-452-5p组(转染anti-miR-452-5p)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-YTHDF2组(转染pcDNA-YTHDF2)、anti-miR-452-5p+si-con组(转染anti-miR-452-5p+si-con)、anti-miR-452-5p+si-YTHDF2组(转染anti-miR-452-5p+si-YTHDF2)转染HepG2细胞；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙锭(PI)双染法检测细胞凋亡率；细胞计数试剂盒(cell counting kit, CCK8)法检测细胞活性；蛋白免疫印迹(western blotting, WB)实验检测细胞中YTHDF2、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白重链(FTH1)的蛋白表达；双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果 与正常肝细胞比较，肝细胞癌细胞(SMMC-7721、HepG2、Huh7、Hep3B)中miR-452-5p显著升高，YTHDF2显著降低(P<0.05);抑制miR-452-5p明显抑制HepG2细胞活性，促进凋亡，促进ROS、SLC7A11、GPX4和FTH1表达(P<0.05)。过表达YTHDF2具有与抑制miR-452-5p相类似的HepG2细胞调控作用。miR-452-5p显著抑制野生型YTHDF2细胞的荧光活性，并负向调控YTHDF2表达。敲减YTHDF2部分逆转抑制miR-452-5p对HepG2细胞凋亡、铁死亡的调控作用。结论 miR-452-5p在肝细胞癌细胞中高表达，抑制miR-452-5p促进癌细胞凋亡、铁死亡，其机制与靶向YTHDF2有关。

• 单位
  河西学院附属张掖人民医院