具有免疫反应性的猪瘟病毒多表位基因在大肠杆菌中的克隆表达和鉴定

作者：侯相民; 田宏; 尚佑军; 田永强; 刘湘涛

来源：生物学杂志, 2012, (05): 6-10.

• 猪瘟病毒
• E2结构糖蛋白
• 多表位抗原
• 抗原活性 classical swine fever virus
• E2 structural glycoprotein
• multiple-epitope antigen
• antigenicity

将猪瘟病毒不同抗原表位基因串联构成重组基因BT21,化学合成后克隆至pMD18-T载体中,然后再将BT21串联基因片段插入原核表达载体pGEX-6P-1。经酶切和测序鉴定后,构建的重组质粒pGEX-BT21转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE分析,用Glutathione Sepharose 4B亲和层析法纯化目的蛋白和Western blot分析其免疫学活性。结果表明:融合蛋白GST-BT21以可溶形式表达,分子量约为33kDa,与预期大小相符,纯化的重组蛋白可被猪瘟病毒阳性血清所识别,具有良好的免疫学活性。从而为进一步研究该融合蛋白的免疫特性和...

• 单位
  生物工程学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 兰州交通大学; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室