摘要
目的 研究蜂毒肽(Melittin, Mel)与依布硒啉(Ebselen, EbSe)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的协同抗菌活性和机制。方法 96微孔板实验结合分光光度法(visible spectrophotometry, UV-vis)检测蜂毒肽-依布硒啉的抗金黄色葡萄球菌作用;电子显微镜(electron microscopy, EM)观察蜂毒肽-依布硒啉处理后金黄色葡萄球菌的细胞形态。通过5,5′-二硫代双(2-硝基苯甲酸)[5,5′-Dithiobis-(2-nitrobenzoic acid),DTNB]获得电子后显色的能力,观察蜂毒肽-依布硒啉对细菌硫氧蛋白还原酶(thioredoxin reductase, TrxR)活性的影响。通过流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测蜂毒肽-依布硒啉对细菌胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)产量的影响;使用活性氧清除剂二硫苏糖醇(dithiothreitol, DTT)复测上述指标。结果 蜂毒肽与依布硒啉具有协同杀菌作用,可协同抑制金黄色葡萄球菌TrxR,显著上调金黄色葡萄球菌胞内活性氧产量。DTT挽救实验证明蜂毒肽-依布硒啉对细菌造成损伤是通过活性氧途径实现。结论 蜂毒肽可通过协同依布硒啉靶向金黄色葡萄球菌TrxR,上调胞内活性氧的大量产生,介导细菌死亡。
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