科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的研究沉默E盒锌指结合蛋白(ZEB)1对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法以乳腺癌细胞MDA-MB-231作为研究对象,用慢病毒LV-ZEB1-siRNA和LV-siRNA control感染细胞,荧光定量PCR和Western印迹检测细胞ZEB1表达水平。MTT法测定乳腺癌细胞增殖能力,流式细胞术分别检测细胞周期和细胞凋亡情况,Western印迹检测细胞周期蛋白p27、细胞周期素(cyclin)E和凋亡蛋白激活型Caspase-3(酶切Caspase-3)蛋白水平,提取细胞线粒体和胞质蛋白,Western印迹方法检测细胞色素(Cytochrome)C蛋白表达情况。结果慢病毒LV-ZEB1-siRNA下调乳腺癌细胞中ZEB1 mRNA和蛋白水平,LV-siRNA control对乳腺癌细胞中ZEB1 mRNA和蛋白水平无影响。沉默ZEB1后的乳腺癌细胞增殖能力降低,细胞G0/G1期比例升高,S期比例降低,细胞中p27蛋白水平升高,cyclin E蛋白水平降低,细胞凋亡率升高,细胞中酶切Caspase-3蛋白水平升高,细胞线粒体中Cytochrome C蛋白水平降低,胞质中Cytochrome C蛋白水平升高,与未经感染的细胞比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论沉默ZEB1具有抑制乳腺癌细胞增殖、阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡的作用。
- 单位
