黄连素通过CagA介导的NF-κB信号通路抑制幽门螺杆菌感染小鼠胃粘膜炎症因子分泌的研究

作者：卢燕君; 吕玉华; 晁艳; 周厚全; 刘思景; 韦佩珊

来源：华南国防医学杂志, 2021, 35(05): 323-328.

DOI：10.13730/j.issn.1009-2595.2021.05.002

• 黄连素
• 细胞毒素相关蛋白A
• 肿瘤坏死因子α
• 幽门螺杆菌
• 胃粘膜
• 炎症因子

目的探讨黄连素对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)感染小鼠胃粘膜的治疗作用及其抑制胃粘膜炎性因子分泌的作用机制。方法将60只SPF级环境饲养昆明(Kunming, KM)小鼠随机分为空白组、模型组、三联组、低剂量黄连素治疗组、中剂量黄连素治疗组和高剂量黄连素治疗组。不对空白组干预,其它5组小鼠Hp感染后依次予无菌生理盐水、兰索拉唑/甲硝唑/克拉霉素、低剂量黄连素、中剂量黄连素、高剂量黄连素灌胃,观察胃粘膜组织的病理改变。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining, HE)染色法检测血清炎性因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、IL-8、环氧化酶2(cyclooxygenase 2,COX-2)等的表达。采用实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)、免疫组化方法检测细胞毒素相关蛋白A(cytotoxin associated gene A,CagA)和核因子κB (nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路p65/p50的表达。Hp感染小鼠原代细胞进行培养,将细胞分为非治疗组,抗Hp治疗组,高剂量黄连素组,中剂量黄连素组,低剂量黄连素组,依次加入相应的无药或含药血清的培养基中继续培养后,检测各组细胞炎症因子、CagA和NF-κB信号通路的表达水平。结果动物实验结果表明,高剂量黄连素治疗组治疗效果最佳,胃粘膜组织炎症得到明显控制,Hp根治率明显提高,同时,血清TNF-a、IL-6、IL-8、COX-2的表达明显降低,与其余组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组以及三联组比较,黄连素各剂量组的CagA、NF-κB p65、NF-κB p50的表达均明显降低(P<0.05)。细胞实验表明,高剂量黄连素组各种炎症因子表达水平最低,且CagA、NF-κB p65、 p50表达水平也最低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论黄连素能抑制Hp阳性胃粘膜组织炎症,减轻炎性损伤,其机制可能是通过抑制CagA-NF-κB信号通路的过度活化而调节炎症有关。

• 单位
  广州中医药大学第二附属医院; 广东燕岭医院