干扰CDH1基因对雨蛙素诱导的急性胰腺炎细胞模型凋亡和自噬的影响

作者：史洋洋; 吴雪生

来源：肝胆外科杂志, 2021, 29(05): 385-389.

• CDH1基因
• 雨蛙素
• 急性胰腺炎
• 凋亡
• 自噬

目的 探讨干扰上皮钙粘素(CDH1)基因对雨蛙素(Caerulein)诱导的大鼠急性胰腺腺泡细胞AR42J凋亡和自噬的影响及可能的机制。方法 体外培养大鼠急性胰腺腺泡细胞AR42J,将CDH1特异性siRNA转染至AR42J细胞，成功干扰CDH1表达后以雨蛙素干预构建急性胰腺炎细胞模型，实验分为空白对照(Mock)组、雨蛙素(Cae)组、雨蛙素+转染对照(Cae+si-NC)组和雨蛙素+转染(Cae+si-CDH1)组，实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测CDH1的表达变化，噻唑蓝(MTT)分析细胞增殖能力，酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎性介质肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot分析凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),自噬标记物Beclin-1、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ以及β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin和其下游靶分子c-Myc和cyclin D1的表达。结果 与Mock组相比，Cae组细胞增殖能力降低，细胞凋亡率升高，细胞中CDH1、Bax、Beclin-1、LC3-Ⅱ、TNF-α和IL-1β、β-catenin、c-Myc和cyclin D1的表达上调，LC3-Ⅰ和Bcl-2的表达下调，差异有统计学意义(P<0.05);与Cae组相比，Cae+si-CDH1组干扰CDH1能够逆转以上各指标，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 干扰CDH1基因可减轻雨蛙素诱导的AR42J细胞凋亡和自噬，其作用机制可能与阻断β-catenin信号通路的激活有关。

• 单位
  安徽医科大学第一附属医院