小鼠肝枯否细胞的分离、培养与鉴定

作者：孙晓东; 周志伟; 万德森; 王国强; 方淯靖; 卢震海; 陈功

来源：中国现代医生, 2007, (06): 22-23+10+81.

• 枯否细胞
• 分离
• 培养
• 鉴定 Kupffer Cell
• Seperation
• Cultivation
• Identification

目的研究BALB/c鼠肝枯否细胞分离、培养和鉴定。方法选用健康雌性8￣10w龄鼠,麻醉无菌取肝,D-Hank’s液注射冲洗去血并剪去部分结缔组织,剪碎肝组织,加入链霉蛋白酶E和I型胶原酶,水浴振荡消化,再加入DNaseI,共同消化。不锈钢筛网滤过,用0.005%DNaseⅠ的1640液清洗细胞液,加Tris-NH4CL溶解红细胞。30%￣70%Percoll梯度离心,用含10%FCS的RPMI-1640贴壁培养4￣6h洗去非贴壁细胞。通过吞噬墨水实验鉴定枯否细胞。结果枯否细胞的数量为(1.07±0.87)×107/g,贴壁率40.3%,用0.4%台盼蓝染色鉴定,细胞存活率在95%以上,吞噬实验...

• 单位
  华南肿瘤学国家重点实验室; 中山大学肿瘤防治中心