白细胞介素17A在肺炎链球菌急性中耳炎黏膜免疫中的作用

作者：徐江红; 梁琼; 刘向; 李雯; 戴文佳

来源：中国眼耳鼻喉科杂志, 2017, 17(05): 318-322+332.

DOI：10.14166/j.issn.1671-2420.2017.05.003

• 白细胞介素17A
• 黏膜免疫
• 急性中耳炎
• 肺炎链球菌

目的探讨白细胞介素17A(IL-17A)在肺炎链球菌急性中耳炎(AOM)黏膜免疫中的作用。方法6~8周无特定病原体(SPF)级BALB/c小鼠,在感染前24 h腹腔注射200μg IL-17A抗体中和体内的IL-17A,注射相同剂量的Ig2a抗体作为对照组(Ig2a),经鼓膜途径注射肺炎链球菌,感染后第5天取中耳灌洗液,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测IL-17A、CXCL2和CXCL5的水平。取中耳听泡,乙二胺四乙酸(EDTA)脱钙,常规石蜡切片,苏木素-伊红(HE)染色,评估中耳炎的严重程度。新型肺炎链球菌Psa A蛋白疫苗经鼻腔途径免疫小鼠,末次免疫后2周取小鼠的脾脏,制成细胞悬液,Psa A抗原刺激72 h,ELISA检测培养上清液IL-17A的水平;末次免疫后2周经鼓膜途径注射肺炎链球菌,攻毒后5 d取中耳灌洗液,ELISA检测IL-17A、CXCL2和CXCL5的水平。中耳攻毒后5 d取中耳黏膜,抽提RNA,反转录c DNA,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测IL-6、防御素β2和CXCL2 mRNA的表达水平。结果在固有免疫中,中和体内的IL-17A,感染肺炎链球菌后,中耳有更严重的炎症反应,且中耳IL-17A、CXCL2和CXCL5分泌减少;在适应性免疫中,新型肺炎链球菌Psa A蛋白疫苗在CTB黏膜佐剂作用下经鼻腔途径免疫后,脾上清液分泌了较高水平的IL-17A,中耳攻毒后中耳黏膜灌洗液中检测到较高水平IL-17A,相关细胞因子CXCL2、CXCL5水平增高,中耳黏膜IL-6、防御素β2、CXCL2 mRNA表达量明显增高。结论 IL-17A在肺炎链球菌AOM黏膜免疫中起重要的保护作用,为AOM的治疗和新一代疫苗的设计及免疫策略的选择提供了实验依据。

• 单位
  复旦大学附属眼耳鼻喉科医院