摘要

目的 快速建立一种动态便捷的观察中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)假病毒感染小鼠的可视化方法。方法 本研究首先采用HeLa细胞体外验证重组腺病毒Ad5-hDPP4及假病毒荧光素酶的表达及功能;然后将表达MERS-CoV受体hDPP4的重组腺病毒通过胸腔注射和腹腔注射的方式转导BALB/c小鼠,继而以胸腔注射或腹腔注射的方式接种携带萤火虫荧光素酶报告基因的高滴度(3×107 TCID50)MERS-CoV假病毒,并通过荧光活体成像仪观察MERS-CoV假病毒在体内的感染过程与分布特点。结果 重组腺病毒Ad5-hDPP4及假病毒荧光素酶在HeLa细胞中能有效表达;重组腺病毒经腹腔转导hDPP4,BALB/c小鼠接种MERS-CoV假病毒48~96 h后,在小鼠的腹部能检测到荧光素酶表达;胸腔转导hDPP4,BALB/c小鼠接种MERS-CoV假病毒后,在48 h左右可检测到荧光素酶在胸腔的表达。结论 本研究报道了一种简便快捷建立MERS-CoV感染可视化小鼠模型的方法,为中和抗体或进入抑制剂的体内评价提供了有效手段。