6-姜酚预处理对乏氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞损伤的保护作用

作者：覃秋语; 吕祥威^*; 武琦; 鲁攀; 赵位昆

来源：四川大学学报（医学版）, 2020, 51(05): 658-663.

• 6-姜酚
• 乏氧复氧
• 氧化应激
• 炎症反应
• H9C2心肌细胞

目的探讨6-姜酚(6-G)预处理是否能够减轻乏氧/复氧(H/R)诱导的H9C2细胞损伤及相关机制。方法采用常规方法制备心肌细胞H/R体外模型〔H9C2细胞加入经氮气饱和后的乏氧液后放于培养箱,通入混合气体(体积分数1%O2,5%CO2,94%N2)作用15 min,培养3 h后取出细胞,置于常氧培养箱(37℃,体积分数5%CO2)进行复氧培养1 h〕。在建立心肌细胞H/R体外模型前给予6-G预处理,采用MTT法测定细胞活力,并筛选6-G干预下细胞活力最大的6-G质量浓度进行后续实验。采用DCFH-DA荧光探针检测6-G预处理对H9C2氧化应激水平的影响,荧光显微镜以及流式细胞仪观察细胞内氧化应激的作用。Western blot法检测H/R诱导细胞炎症反应因子中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)表达的变化。结果与H/R组相比,6-G+H/R组细胞活力从50μg/mL 6-G组开始上升,200μg/mL 6-G时细胞活力最大,后续实验选6-G干预质量浓度为200μg/mL。与对照组相比,200μg/mL 6-G组活性氧(ROS)含量无明显变化(P>0.05),ROS荧光波峰未见明显迁移,H/R组ROS的含量升高,差异有统计学意义(P<0.05),ROS荧光波峰向右侧迁移,与H/R组相比,6-G+H/R组ROS含量降低,差异有统计学意义(P<0.05),ROS荧光波峰向左侧回移。与对照组相比,6-G组TNF-α、IL-6、IL-1β的表达无明显变化(P>0.05);H/R组TNF-α、IL-6、IL-1β的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与H/R组相比,6-G+H/R组TNF-α、IL-6、IL-1β的表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 6-G预处理能够减轻H/R诱导的H9C2心肌细胞损伤,其机制可能与抑制氧化应激和炎症反应有关。

• 单位
  桂林医学院附属医院; 徐州医科大学