猪霍乱沙门氏菌RPA-LFS快速检测方法的建立

作者：周红蕾; 钱俞佳; 刘静

来源：吉林农业大学学报, 2021, 1-6.

• 猪霍乱沙门氏菌
• 侵袭蛋白A
• 重组酶聚合酶等温扩增
• 侧向流层析试纸条

本研究旨在建立一种快速、准确的猪霍乱沙门氏菌现场检测方法. 针对猪霍乱沙门氏菌侵袭蛋白A（invasion protein A， invA）基因序列设计特异性引物和探针，优化反应条件， 建立了重组酶聚合酶等温扩增结合侧向流层析试纸条（RPA-LFS）检测方法. 结果表明， 建立的方法在39℃等温条件下15 min内即可特异性检出猪霍乱沙门氏菌， 与金黄色葡萄球菌、副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、铜绿假单胞菌、单增李斯特菌无交叉反应， 该方法对猪霍乱沙门氏菌的最低检出限为1 cfu/反应. 应用该方法对50份猪肉样本进行检测， 与PCR方法检测结果一致. 结果提示， 本研究建立的猪霍乱沙门氏菌现场RPA-LFS检测方法敏感性高、特异性强、反应快速、操作简便的特点， 可应用于猪霍乱沙门氏菌的临床快速检测.

• 单位
  江苏农牧科技职业学院