利用CRISPR/Cas9技术创制番茄粉果和无绿肩材料

作者：李国斌; 蔡梁玉; 肖立成; 王家发; 张得迪; 张俊红^*

来源：园艺学报, 2023, 50(05): 985-999.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2022-0273

• 番茄
• 基因编辑
• SlGLK2
• SlMYB12
• 粉果
• 绿肩果

以栽培番茄品种（系）Ailsa Craig(AC)、B5和B9为试材，利用CRISPR/Cas9双元表达载体系统，对番茄品质调控关键基因SlGLK2和SlMYB12进行定点敲除。获得AC背景下SlGLK2和SlMYB12的基因编辑植株各9株，B5背景下SlGLK2的基因编辑植株3株，B9背景下SlMYB12的基因编辑植株4株。通过对靶点测序发现，在靶位点的PAM上游3～4 bp处发生了不同形式的碱基缺失、插入或替换，主要以1～10 bp的缺失和单碱基G和T的插入为主；也产生了两靶点间的大片段缺失，最大片段为334 bp。AC背景下敲除SlMYB12产生粉色果实，敲除SlGLK2基因，果实肩部的绿色明显变浅，B5背景下的3株基因编辑番茄均无“绿肩”。本研究中利用CRISPR/Cas9技术在不同番茄种质中成功创制了敲除SlGLK2或SlMYB12的基因编辑材料，以期为番茄品质育种提供优良种质。

• 单位
  华中农业大学; 园艺林学学院