中性粒细胞弹力蛋白酶引起黏蛋白5AC高表达的信号转导机制

作者：李琪; 周向东

来源：中华医学杂志, 2007, 87(05): 348-352.

DOI：10.3760/j:issn:0376-2491.2007.05.015

• 白细胞弹性蛋白酶
• 活性氧组分
• 黏蛋白类

目的研究中性粒细胞弹力蛋白酶(NE)通过表皮生长因子受体(EGFR)引起黏蛋白(MUC)5AC 高表达的上游信号通路。方法培养人气道 BEAS-2B 上皮细胞,给予 NE 刺激,以肿瘤坏死因子转换酶抑制剂-1(TAPI-1)及活性氧(ROS)清除剂 DMTU 为干预因素。RT-PCR 检测干预前后细胞中 MUC5AC mRNA 含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测培养上清中 MUC5AC、可溶性转化生长因子(TGF)-α蛋白含量;Western 印迹分析磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)蛋白水平。结果NE 刺激后引起 MUC5AC 基因转录和蛋白表达水平明显高于未给予 NE 刺激的对照组(P<0.01),同时伴随可溶性 TGF-α及 p-EGFR 蛋白水平的增高,与对照组相比,差异有统计学意义(均 P<0.01);加入浓度为20μmol/L 的肿瘤坏死因子转换酶抑制剂 TAPI-1后可明显下调上述指标的表达水平(均 P<0.01),DMTU 也同样降低了 MUC5AC 的基因转录、产物水平以及可溶性 TGF-α蛋白相对含量,与单纯 NE 刺激组比较差异均有统计学意义(P<0.01),但对单纯外源性 TGF-α刺激组引起的MUC5AC 基因转录和蛋白合成增加无明显作用(均 P>0.05)。结论 NE 能刺激细胞产生 ROS,再活化肿瘤坏死因子转换酶(TACE)引起黏蛋白产生的增多,组成 EGFR 通路上游的主要信号分子,故ROS/TACE/TGF-α前体/ECFR 转导途经是 NE 引起气道黏液高分泌的重要机制。

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院