神经钙粘连素胞外结构域的分离和表达

作者：黄跃龙; 许静; 李侠; 刘俊霞; 卢光琇; 宋增璇

来源：中国病理生理杂志, 2006, 22(03): 520-523.

DOI：10.3321/j.issn:1000-4718.2006.03.024

• 钙粘着糖蛋白类
• 细胞外结构域
• 基因表达 Cadherins
• Extracellular domain
• Gene expression

目的:分离和表达神经钙粘连素(N-cadherin,N-cad)胞外结构域cDNA并观察其表达蛋白质的免疫原性。方法:从胚胎肝脏和骨髓中分离出CD34+细胞,提取总RNA,RT-PCR扩增N-cad胞外结构域cDNA,插入表达载体pOPE101-215,重组载体pOPE-N-cad,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以所表达蛋白免疫小鼠。结果:分离片段符合预期大小,DNA测序正确。重组质粒转化宿主菌XL1-Blue后,经IPTG诱导表达出了约70kD目的蛋白。免疫5次后,小鼠血清中可检出抗N-cad抗体。结论:CD34+细胞表达N-cad基因,其胞外结构域cDNA表达产物具有...

• 单位
  中南大学; 实验血液学国家重点实验室; 生殖与干细胞工程研究所