几种蜱MLP基因的表达及其表达产物反应原性的分析

作者：沈辉; 刘光远; 柴慧萍; 田占成; 谢俊仁; 罗金; 张萍; 田美媛; 殷宏

来源：中国兽医科学, 2012, (08): 776-783.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2012.08.017

• 蜱
• MLP
• 原核表达
• 反应原性分析 tick
• muscle LIM protein(MLP)
• prokaryotic expression
• reactionogenicity

通过对饥饿的长角血蜱雌性成蜱cDNA表达文库中筛选到的未知基因进行5′RACE扩增,以期获得长角血蜱MLP基因全长cDNA序列。设计通用引物,采用PCR方法分别从青海血蜱、麻点璃眼蜱、森林革蜱、微小牛蜱及小亚璃眼蜱中对MLP基因完整的开放阅读框进行了扩增,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒,转入BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot分析目的蛋白的表达情况和反应原性。结果表明,成功扩增了长角血蜱的MLP基因全长序列及多个蜱种的MLP基因开放阅读框序列,体外高效诱导表达了约39.2ku的不同蜱的MLP重组蛋白。Western-...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室