Prdx1通过维持线粒体稳态调节巨噬细胞的极化

作者：张翔; 张子悦; 祁一鸣; 张晓娜; 殷松娜^*

来源：生物工程学报, 2023, 1-14.

DOI：10.13345/j.cjb.230667

• 巨噬细胞
• 极化
• 线粒体
• Prdx1

为了研究过氧化物还原酶1 (peroxiredoxin 1， Prdx1)在巨噬细胞极化过程中的作用。使用脂多糖(lipopolysaccharides， LPS)联合干扰素γ (interferon gamma， IFNγ)、白细胞介素-4 (interleukin-4， IL-4)处理小鼠白血病单核巨噬细胞(mouse leukemia cells of monocyte macrophage， RAW264.7)，敲除Prdx1标记为Prdx1-/-组，采用流式细胞术检测巨噬细胞分化标志物，酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay， ELISA)法检测细胞因子水平，检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric-oxide synthase， iNOS)和精氨酸酶-1(arginase-1， Arg-1)活性反应和Prdx1-/-细胞氧化损伤情况，通过能量分析仪检测细胞胞外酸化率和氧消耗速率，线粒体膜电位染料(mitochondrial membrane potential dye， JC-1)荧光探针法检测线粒体膜电位，荧光染色法检测线粒体超氧化物水平，并用线粒体活性氧(reactive oxygen species， ROS)清除剂处理RAW264.7细胞来评估细胞极化情况。结果表明，敲除Prdx1导致巨噬细胞ROS、过氧化氢和8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine， 8-OHDG)水平升高，线粒体拷贝数降低，线粒体内膜转位酶23 (translocase of inner mitochondrial membrane 23， TIM23)蛋白和热休克蛋白60(heat shock protein 60， HSP60)表达减少，线粒体膜电位下降，超氧化物增多，三磷酸腺苷(adenosine-triphosphate， ATP)水平降低，在1型巨噬细胞(type 1 macrophage， M1)中敲除Prdx1，细胞外酸化率(extra cellular acidification rate， ECAR)增加，在2型巨噬细胞(type 2 macrophage， M2)中敲除Prdx1，耗氧率(oxygen consumption rate， OCR)降低；表明敲除Prdx1能够通过损伤巨噬细胞线粒体来降低其氧化磷酸化功能，导致巨噬细胞倾向M1型极化而抑制其向M2型极化，本研究可为巨噬细胞介导的免疫治疗提供新的治疗策略。

• 单位
  延安大学