摘要
目的利用温控表达调节系统在布鲁氏菌中诱导表达裂解基因E,制备布鲁氏菌S2株菌壳,监测其裂解效率,并观察菌壳形态。方法从pBV220∶∶E中PCR扩增温控裂解盒和裂解基因E融合片段,克隆至pBBR1MCS-2载体上,构建重组裂解质粒pBBR1MCS-E,并将其电转化至布鲁氏菌S2株,构建重组菌S2(pBBR1MCS-E)。通过28℃至42℃升温诱导培养制备布鲁氏菌菌壳,绘制生长曲线和裂解曲线,计算裂解率,并电镜观察菌壳形态。结果成功构建了重组裂解质粒pB-BR1MCS-E并制备了布鲁氏菌菌壳。绘制出了布鲁氏菌裂解曲线,布鲁氏菌菌壳的裂解率达99.99%,经高渗溶液冻融后可完全消除其中残存的活菌。...
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单位军事医学科学院军事兽医研究所