赖氨酸特异性去甲基化酶1增强胰腺癌PanC1细胞E3泛素连接酶对p16的抑制作用

作者：陈辉星; 陈实; 李小燕; 陈明源; 严茂林; 黄龙

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(11): 1922-1924.

• 胰腺癌
• 赖氨酸特异性去甲基化酶1
• E3泛素连接酶
• p16

目的观察胰腺癌PanC1细胞中组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)对E3泛素连接酶(Ring1B)抑制抑癌基因p16转录及表达作用的影响。方法通过采用短发夹RNA(shRNA)分别在PanC1细胞中敲除Ring1B(重复2组为shRing1B#1、#2)和LSD1基因(shLSD1#1、#2),未敲除组为shLuc,分别通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测PanC1细胞LSD1、Ring1B和p16基因的表达;而后通过质粒转染过表达Ring1B,再敲除LSD1基因,检测PanC1细胞p16的表达。结果 Ring1B基因敲除后RT-qPCR结果显示p16 mRNA转录增加,shRing1B#1、shRing1B#2(4.613±0.416、4.615±0.224)高于shLuc(1.010±0.032)(P=0.000);Western blot结果显示Ring1B基因敲除组p16蛋白表达增加;LSD1基因敲除后p16 mRNA转录和蛋白表达也增加,shLSD1#1、shLSD1#2组和shLuc组对应数值分别为4.704±0.503、3.885±0.011和1.008±0.027(P=0.005)。Ring1B过表达的PanC1细胞中(Ring1B组),LSD1敲除组shLSD1+vector组(5.893±0.986)高于对照组shLuc+vector组(1.010±0.201);shLSD1+Ring1 B组(0.695±0.031)高于shLuc+Ring1B组(0.156±0.016)(P=0.001)。结论 LSD1与Ring1B协同作用,共同参与抑制胰腺癌p16的转录表达;LSD1能够增强Ring1B抑制p16转录的作用。

• 单位
  福建医科大学附属协和医院; 福建省立医院; 福建医科大学