脑红蛋白对氧糖剥夺/复氧复糖诱导的人神经母细胞瘤细胞系自噬的影响

作者：邓松筠; 艾宇航; 龚华; 吴龙; 陈采霞; 王译民; 刘志勇; 黄立; 彭倩宜; 张丽娜^*

来源：中华医学杂志, 2017, 97(19): 1505-1509.

• 脓毒症
• 缺氧, 脑
• 线粒体
• 氧糖剥夺

目的探讨脑红蛋白(Ngb)对氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)诱导的人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)自噬的影响。方法通过在SH-SY5Y细胞中转染Ngb质粒, 建立Ngb过表达(NGB OE)及相应的空载(Vector)稳转株。细胞行OGD/R处理。聚合酶链反应(PCR)检测自噬相关基因(Atg5、Atg7、BECN1)及FUN14结构域包含蛋白-1(FUNDC1) mRNA表达水平, 免疫印迹方法检测自噬相关基因(LC3 Ⅱ/Ⅰ)蛋白表达水平。差速离心法分离线粒体及细胞质, 分别使用免疫印迹方法检测帕金森病相关蛋白(Parkin、Pink1)表达水平。结果 OGD/R处理后, 自噬相关基因Atg5、Atg7、BECN1、FUNDC1 mRNA水平升高(最高分别为4.90±0.71、6.72 ±0.75、2.71±0.39及3.96±0.78倍, 均P<0.05), 细胞质中Parkin减少而线粒体中Parkin显著增加。过表达Ngb不能改变自噬相关基因Atg5、Atg7、BECN1 mRNA水平, 细胞质或线粒体中Parkin无显著变化。但可以增加FUNDC1 mRNA含量(3.96±0.78倍比6.86±0.63倍, P<0.05)。结论 Ngb不能影响OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞自噬或线粒体自噬水平, 而对FUNDC1基因的表达有促进作用, 其作用机制需要进一步深入研究。

• 单位
  中南大学湘雅医院