阿法替尼联合Mithramycin A对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及基因表达的影响

作者：黄子凌; 黄兰姗; 沈思乔; 冯振博

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2015, 35(05): 638-643.

• 肝细胞癌
• HepG2细胞
• 阿法替尼
• Mithramycin A
• 表皮生长因子受体
• Sp1

目的 :观察阿法替尼(afatinib)联合Mithramycin A(MIT)对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡的作用以及相关因子表达的影响。方法:将afatinib与MIT单独或联合作用于肝癌Hep G2细胞,采用MTT法测定药物对细胞生长的抑制率,并运用倒置显微镜观察药物作用后细胞形态学变化;以流式细胞技术测定药物对细胞周期和凋亡的影响;以实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)定量测定细胞内表皮生长因子受体(EGFR)、Sp1、Sp3以及增殖、凋亡相关因子Cyclin-D1、Cyclin-E2、Bcl-2、Caspase3、Caspase9和p53的表达变化。结果 :afatinib与MIT均能有效抑制肝癌Hep G2细胞的生长,并且呈现时间依赖性,两药联合作用能明显增加抑制率(P均<0.05);联合用药48 h后,可诱导Hep G2细胞产生G0/G1期阻滞并诱发凋亡,抑制作用及凋亡率均较单药组增高(P均<0.05);另外,给药72 h后,单药组均出现不同程度的Cyclin-D1、Cyclin-E2、Bcl-2 m RNA表达量下降,并伴有Caspase3基因上调。单用afatinib组同时出现Caspase9和p53的表达上调,MIT组检测到EGFR、Sp1和Sp3的同步减少,联合用药组以上改变较单药组明显(P均<0.05)。结论:afatinib联合MIT能有效抑制肝癌Hep G2细胞增殖、促进凋亡,这可能与药物作用后Cyclin-D1、Cyclin-E2、Bcl-2下调以及Caspase3、Caspase9和p53的表达上调相关。此项研究可能为以EGFR为中心的肝癌联合治疗提供新方向。

• 单位
  广西医科大学第一附属医院