毛细管直接PCR方法快速鉴定NDM-1阳性细菌

作者：周小棉; 刘大渔; 黄华霖

来源：国际检验医学杂志, 2011, (13): 1404-1406.

• 聚合酶链反应
• 基因
• 诊断
• 新德里金属酰胺酶 polymerase chain reaction
• genes
• dignosis
• New Delthi metallo-bata-lactamase

目的建立一种无需核酸提取预处理的毛细管PCR方法,用于新德里金属酰胺酶(NDM-1)阳性细菌的快速鉴定。方法考察在直接加入细菌培养液条件下,两种改良型DNA聚合酶Terra和MightyAmp DNA聚合酶对NDM-1编码基因的扩增效果。选用其中一种DNA聚合酶进行毛细管PCR,确定其对于NDM-1阳性细菌的检测限。结果当分别向25 μLPCR反应体系加入1、3、5、7μL细菌培养液条件下,两种DNA聚合酶均能有效扩增NDM-1编码基因序列,Terra DNA聚合酶效果较好。采用两步法毛细管PCR扩增NDM-1编码基因,3 μL反应体积条件下,40个循环反应在20 min内完成。结论应用改良型...

• 单位
  广州医科大学; 广州市第一人民医院