摘要
目的:优化接骨木叶中总黄酮的提取工艺,建立骨质疏松模型,研究接骨木叶总黄酮的抗骨质疏松作用。方法:以接骨木叶为原料,以总黄酮得率为响应值,分别考察乙醇体积分数、液料比、温度等几个因素对接骨木叶总黄酮得率的影响,在单因素实验的基础上采用响应曲面法中的Box-Behnken设计,优化接骨木叶总黄酮提取工艺。建立链脲佐菌素小鼠骨质疏松模型,检测小鼠血清中ALP、ACP、Ca、P、TRAP、BGP等指标变化以及HE染色观察骨组织形态。结果:接骨木叶总黄酮的最佳提取工艺条件为提取温度70℃、提取时间60 min、乙醇体积分数70%、液料比70:1(mL:g),平均得率为7.249%,其所得总黄酮纯度为31.3%。抗骨质疏松作用研究中,接骨木叶总黄酮各剂量组中钙、磷、ALP、ACP、TRAP骨钙素水平差异显著,并随着接骨木叶总黄酮浓度的增加,血清钙水平、ALP水平显著降低(P<0.05,P<0.01),ACP、磷、TRAP水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。从病理切片来看,随着接骨木叶总黄酮剂量的增加,骨基质明显增多,骨小梁增厚,成骨细胞增多,破骨细胞减少,骨密度增加。结论:接骨木叶总黄酮对链脲佐菌素小鼠骨质疏松模型效果显著,能起到良好的抗骨质疏松作用。
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