微小RNA-203靶向RGS17蛋白对食管癌细胞增殖、周期和迁移的影响

作者：张宁; 魏立; 马丽斌; 务森; 董冠中; 汤金星; 侯广杰; 唐富东; 何苡

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(11).

• 微小RNA-203
• 食管癌
• 增殖
• 凋亡
• 周期
• 迁移

目的探讨微小RNA(miR)-203靶向RGS17蛋白对食管癌细胞增殖、周期和迁移的影响。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析正常食管上皮细胞HEEC、食管癌细胞TE-8、EC9706和EC-11中miR-203表达水平。将对数生长期食管癌细胞EC9706分为对照组和miR-203组, 分别采用对照组和miR-203过表达慢病毒感染, 筛选稳定细胞系。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验分析两组细胞增殖能力;采用流式细胞术分析两组细胞凋亡和周期变化;采用Transwell实验分析两组细胞迁移能力;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-203靶基因;采用蛋白免疫印迹分析靶基因及相关蛋白表达水平。计量资料比较采用t检验。结果正常食管上皮HEEC细胞miR-203表达水平(1.19±0.17)明显高于食管癌TE-8、EC9706和EC-11细胞miR-203表达水平(0.56±0.11、0.39±0.09、0.47±0.10), 差异有统计学意义(t=3.719、4.498、3.909, P<0.05)。对照组细胞miR-203表达水平(1.07±0.12)明显低于miR-203组细胞miR-203表达水平(3.41±0.19), 差异有统计学意义(t=5.576, P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(1.95±0.19)明显高于miR-203细胞A值(1.36±0.16), 差异有统计学意义(t=3.274, P<0.05)。对照组细胞克隆形成率[(69.94±6.51)%]明显高于miR-203组细胞克隆形成率[(39.55±4.91)%], 差异有统计学意义(t=5.901, P<0.05)。对照组细胞G0/G1期比例[(40.27±5.71)%]明显低于miR-203组细胞G0/G1期比例[(54.90±5.98)%], 差异有统计学意义(t=3.821, P<0.05)。对照组细胞S期比例[(30.16±4.20)%]明显高于miR-203组细胞S期比例[(21.85±4.09)%], 差异有统计学意义(t=3.019, P<0.05)。对照组细胞G2/M期比例[(28.86±3.57)%]明显高于miR-203组细胞G2/M期细胞比例[(24.66±4.01)%], 差异有统计学意义(t=2.621, P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(146.38±16.10)个]明显高于miR-203组细胞迁移数量[(85.32±10.57)个], 差异有统计学意义(t=6.926, P<0.05)。RGS17是miR-203的靶基因。对照组细胞RGS17表达水平(3.09±0.31)明显高于miR-203组细胞RGS17表达水平(1.74±0.20), 差异有统计学意义(t=5.194, P<0.05)。结论 miR-203通过靶向RGS17蛋白调控食管癌细胞增殖、凋亡、周期和迁移。

• 单位
  郑州大学; 河南省人民医院; 河南大学