摘要
目的探讨连接蛋白43(Cx43)在同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)对心肌细胞自噬影响中的作用机制。方法将H9C2心肌细胞随机分为3组:对照组、Hcy处理组和Cx43特异性阻断剂Gap26预处理组。Hcy处理组给予3 mmol/L Hcy作用24 h,Gap26预处理组先给予0.5μmol/L Gap26预处理30 min,再给予3 mmol/L Hcy作用24 h。实时定量PCR检测心肌细胞自噬标志分子LC3、Beclin1的mRNA水平,Western blotting检测心肌细胞Cx43、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1的蛋白水平,激光共聚焦显微镜观察心肌细胞Cx43、LC3、Beclin1的表达。结果与对照组相比,Hcy处理组Cx43水平显著升高,自噬标志分子LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin1明显下降;与Hcy处理组相比,Gap26预处理后Cx43水平明显降低,而LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin1明显上调。LC3、Beclin1及Cx43主要表达于细胞膜和细胞质。结论 Hcy可能通过上调Cx43降低心肌细胞自噬。
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单位石河子大学; 石河子大学医学院第一附属医院