乌司他丁调节CCL2-CCR2信号轴对胃癌细胞上皮间质转化和免疫逃逸的影响分析

作者：王芳; 胡洁琼; 冯彦虎; 何东^*

来源：中国免疫学杂志, 2023, 1-15.

• 乌司他丁
• CCL2-CCR2信号轴
• 胃癌
• 上皮间质转化
• 免疫逃逸

目的:探讨乌司他丁(UTI)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-C-C趋化因子受体2(CCR2)信号轴对胃癌(GC)细胞上皮间质转化(EMT)和免疫逃逸的影响分析。方法：实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、western blot分别检测GC组织/细胞中CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达水平；以不同浓度的UTI(0、100、200、400、800U/mL)干预细胞，MTT法检测细胞增殖情况；将AGS细胞分为control组、UTI组、pcDNA组、pcDNA-CCL2组，平板克隆和Transwell小室分别检测细胞增殖、迁移、侵袭。AGS细胞和CD8+T细胞共培养后，将CD8+T分为T细胞组、共培养组、UTI组、pcDNA组、pcDNA-CCL2组，流式细胞仪检测CD8+T细胞凋亡，酶联免疫吸附(ELISA)法检测CD8+T细胞上清中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；Western blot检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、程序性死亡配体1(PD-L1)及CCL2-CCR2信号通路蛋白表达。结果:在GC组织/细胞中CCL2、CCR2蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05)；UTI显著抑制AGS细胞增殖、迁移、侵袭及EMT，降低AGS细胞中MMP-2、vimentin、PD-L1、CCL2、CCR2蛋白表达，升高E-cadherin蛋白表达(P<0.05)；过表达CCL2可逆转UTI对细胞增殖、迁移、侵袭及EMT的抑制作用；与T细胞组比较，共培养组CD8+T细胞IFN-γ、IL-2、TNF-α水平降低，细胞凋亡率增加(P＜0.05)；与共培养组比较，UTI组CD8+T细胞IFN-γ、IL-2、TNF-α水平升高，细胞凋亡率降低(P＜0.05)；与pcDNA组比较，pcDNA-CCL2组CD8+T细胞上述指标变化均显著逆转(P＜0.05)。结论:UTI可能通过抑制CCL2-CCR2信号通路抑制AGS细胞EMT和免疫逃逸。

• 单位
  第二临床医学院; 兰州大学第二医院