摘要
目的体外研究高良姜含药血清及主要成分对TRPA1信号通路的影响。方法以稳定表达TRPA1通道的HEK-293T细胞为体外研究模型,分别采用RT-PCR、Western blot、ELISA、激光共聚焦荧光显微镜研究高良姜含药血清对TRPA1 mRNA和蛋白、细胞内cAMP和Ca2+浓度的影响,并初步确认高良姜3类主要成分对TRPA1表达的影响;采用高效液相色谱法检测高良姜含药血清中的主要有效成分。结果与空白血清组相比,高良姜含药血清对TRPA1 mRNA及蛋白的表达均具有一定的抑制作用,能增加细胞中cAMP含量,降低细胞内Ca2+浓度;黄酮类成分20 mg·L-1与二芳基庚烷类40 mg·L-1对TRPA1 mRNA表达有明显的抑制作用;HPLC结果表明高良姜素和二芳基庚烷是高良姜含药血清的主要入血成分。结论高良姜可以下调TRPA1/Ca2+信号通路,提高细胞内cAMP含量,该作用可能是其温中止痛分子机制的重要基础,主要物质基础是黄酮类和二芳基庚烷成分。
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