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摘要
【目的】研究干扰雄性小鼠睾丸Clock基因后,对小鼠胚胎着床及后期胎鼠发育的影响,并从甲基化的角度探讨引起胎鼠发育异常的原因。【方法】将成年雄性小鼠分为干扰组和对照组,分别于睾丸中注射干扰质粒和阴性质粒,与经过促排处理的雌鼠合笼,研究比较两组胚胎着床情况,观察两组胎鼠的外形及体重等指标的差异;观察胎鼠组织结构,比较两组是否存在差异;分析胎鼠总甲基化水平,同时测定甲基转移酶(DNMTs)水平,比较两组是否存在差异。【结果】:(1)与对照组比较,干扰组胚胎着床数下降(14.5 vs.20.33),胎儿体重减轻,死胎和异常胎数增多(P<0.05)。(2)干扰组胎鼠的心脏和脊柱发育分节出现异常。(3)11.5～16.5 dpc阶段胎鼠总甲基化水平,干扰组较对照组显著降低(8.59 vs.18.25);干扰组甲基转移酶DNMT3B-4的相对IOD值低于对照组(0.124 vs.0.141),有统计学意义。【结论】干扰雄性小鼠睾丸Clock基因,可导致胚胎着床数下降,胎鼠发育异常增多,体重减轻。甲基转移酶DNMT3B-4水平下调及总甲基化水平下降,可能是影响胎鼠发育异常的原因。本研究表明Clock基因与胎鼠发育密切相关,初步探讨引起不育的机制,为揭示该类疾病发病机制提供依据。
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