CGRP通过抑制过度自噬减轻缺氧/复氧心肌细胞损伤

作者：赵丽; 原大江^*

来源：中国老年学杂志, 2023, 43(04): 941-946.

• 降钙素基因相关肽
• 缺血再灌注损伤
• 自噬
• 细胞凋亡

目的 研究探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对缺氧/复氧(H/R)H9c2心肌细胞自噬的影响及其潜在的机制。方法 将六孔板中的H9c2心肌细胞随机分为4组，每组3孔：空白组、正常培养细胞、H/R组(对H9c2心肌细胞缺氧3 h复氧2 h,制备H/R模型)、H/R+CGRP(CGRP组),于H/R前20min向培养孔中加入1×10-1 mol/L CGRP预处理。H/R组+CGRP+CGRP8～37(CGRP8～37组)于H/R前30 min加入1×10-7 mol/L CGRP8～37作用10 min,加入CGRP作用20 min。利用台盼蓝染色检测细胞存活率；检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性；利用Tunel法检测细胞凋亡；采用荧光探针JC-1检测线粒体膜电位水平；利用Western印迹法测定H9c2心肌细胞微管相关蛋白Ⅰ轻链(LC)3Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin-1、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、P-mTOR的表达水平。结果 与空白组相比，H/R处理后H9c2心肌细胞存活率明显降低，LDH活性及细胞凋亡率明显升高，Beclin-1表达明显升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高，p-AKT/AKT比值、p-mTOR/mTOR比值明显降低，线粒体膜电位显著降低(均P<0.01)。与H/R组相比，CGRP组H9c2心肌细胞存活率明显升高，p-AKT/AKT比值、p-mTOR/mTOR比值明显升高，乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞凋亡率明显降低，Beclin-1蛋白表达显著降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显降低，显著抑制H/R诱导的H9c2心肌细胞线粒体膜电位明显降低(均P<0.01)。与CGRP组比较，CGRP抑制剂CGRP8～37可逆转CGRP对H9c2心肌细胞的作用。结论 CGRP可能通过激活AKT/mTOR通路抑制过度自噬，从而保护H/R心肌细胞。

• 单位
  山西医科大学第二医院; 山西医科大学