正交设计优化辣椒SRAP-PCR反应体系及引物筛选

作者：周坤华; 方荣; 陈学军; 缪南生; 王悟亮

来源：江西农业大学学报, 2010, 32(03): 595-600+632.

DOI：10.13836/j.jjau.2010111

• 辣椒
• SRAP
• 正交设计
• 体系优化
• 引物筛选

以辣椒基因组DNA为模板,采用L16(45)正交试验设计,对SRAP反应体系中的5种关键因素(TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA)进行优化,结果表明,辣椒SRAP-PCR最佳反应体系为:TaqDNA聚合酶0.75 U、Mg2+0.6 mmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.8μmol/L、模板DNA 50 ng,总体积为10μL。运用该体系对辣椒3份种质材料进行验证,证明该体系稳定可靠,并从198个SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的35个引物组合。该体系的建立与多态性引物组合的筛选为SRAP标记技术在辣椒分子遗传学中的应用提供科学依据。

• 单位
  江西省农业科学院蔬菜花卉研究所; 江西省农业科学院; 油料作物重点实验室