OTUD6B-AS1通过miR-21-5p对高糖诱导的ARPE-19细胞增殖、迁移的影响

作者：李敏; 李霞^*; 王征; 李印; 王亚丽

来源：眼科新进展, 2022, 42(05): 364-368.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2022.0073

• OTUD6B-AS1
• miR-21-5p
• 视网膜色素上皮细胞

目的 探讨高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)中含有卵巢肿瘤结构域的6B反义RNA 1(OTUD6B-AS1)的功能及其作用机制。方法 取ARPE-19细胞，加入含30 mmol·L-1葡萄糖的培养基培养，设为高糖组，另取ARPE-19细胞不做任何处理设为对照组。用LipofectamineTM 2000转染试剂分别将过表达空质粒(pcDNA-NC组)、OTUD6B-AS1过表达质粒(pcDNA-OTUD6B-AS1组)和OTUD6B-AS1过表达质粒+miR-21-5p模拟物(pcDNA-OTUD6B-AS1+miR-21-5p mimics组)转染进高糖诱导的ARPE-19细胞。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中OTUD6B-AS1和miR-21-5p的表达；用CCK-8法检测各组细胞增殖能力；流式细胞术检测细胞凋亡情况；细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力；荧光素酶报告基因实验验证OTUD6B-AS1与miR-21-5p的靶向关系。结果 与对照组比较，高糖组ARPE-19细胞中OTUD6B-AS1表达量显著降低、miR-21-5p表达量显著升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较，高糖组细胞凋亡率显著升高，细胞增殖率和迁移率均显著降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与pcDNA-NC组比较，pcDNA-OTUD6B-AS1组中细胞增殖率和迁移率显著升高，细胞凋亡率显著降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示，OTUD6B-AS1可靶向miR-21-5p。与pcDNA-OTUD6B-AS1组比较，pcDNA-OTUD6B-AS1+miR-21-5p mimics组细胞凋亡率显著升高，细胞增殖率和迁移率显著降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 OTUD6B-AS1可抑制高糖诱导的ARPE-19细胞凋亡，并促进细胞增殖和迁移，其作用机制与miR-21-5p有关。

• 单位
  武汉大学中南医院