抑制神经前体细胞表达下调因子8对前列腺癌细胞生物学行为及其雄激素受体表达的影响

作者：李国灏; 万志华; 郭永连; 陈琳; 吴钉

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(08): 1363-1366.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.08.032

• 前列腺癌
• 神经前体细胞表达下调因子8
• 雄激素受体
• RNA干扰

目的慢病毒介导短发卡RNA(shRNA)靶向抑制前列腺癌细胞株LnCaP、VCaP细胞的抑制神经前体细胞表达下调因子8(NEDD8)的表达,观察其对雄激素受体(AR)、前列腺特异性抗原(PSA)的表达以及细胞生物学行为的影响。方法构建NEDD8短发夹RNA(NEDD8-shRNA)稳定转染的LnCaP、VCaP细胞株。实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及Western blot法检测NEDD8、AR及PSA mRNA及蛋白表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡、TranswellTM实验检测细胞侵袭能力。结果 NEDD8-shRNA慢病毒转染后,LnCaP、VCaP细胞NEDD8 mRNA表达量分别是空白对照组的(0.11±0.03)、(0.16±0.04)倍,AR mRNA表达量分别为(0.52±0.04)、(0.42±0.05)倍,PSA mRNA的表达量分别为(0.49±0.04)、(0.59±0.06)倍。慢病毒转染后,LnCaP、VCaP细胞NEDD8蛋白相对表达量分别为(11.26±2.65)%、(6.26±2.04)%,AR蛋白相对表达量分别为(30.36±4.35)%、(15.36±3.37)%,PSA蛋白相对表达量分别为(13.37±2.70)%、(11.36±2.67)%。与对照组比较,NEDD8、AR、PSA mRNA及蛋白表达均显著下降(P=0.000)。慢病毒转染后,与对照组比较,LnCaP、VCaP细胞增殖显著抑制;转染后LnCaP、VCaP细胞株凋亡率分别为(15.08±1.23)%、(20.37±1.76)%,与对照组比较显著增加(P=0.001、0.000);穿膜细胞数显著减少(P=0.000、0.004),分别为(55.5±12.5)、(60.8±11.3)个。结论 NEDD8可能在转录水平参与了对AR表达调控,通过抑制NEDD8基因能有效抑制LnCaP、VCaP中AR表达及细胞的增殖、侵袭能力,诱导细胞凋亡。

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 武汉市中心医院