钙转运蛋白基因siRNA表达载体的构建及鉴定

作者：杨新宇; 张雷; 郑花; 康劲松; 李洪岩; 房学东

来源：中国免疫学杂志, 2008, 24(03): 257-259+262.

• siRNA
• RNA干扰
• 钙转运蛋白
• 人胃癌细胞株BGC-823

目的:构建针对钙转运蛋白(CaT1)特异性干扰RNA(siRNA)及其表达载体,并检测其对CaT1基因的干扰作用。方法:设计CaT1靶向的发夹状siRNA,合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSilencer3·1-H1载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体转染法转染人类胃癌细胞BGC,通过RT-PCR检测CaT1基因表达水平的变化。结果:酶切鉴定与DNA测序分析证明CaT1基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CaT1基因的表达水平明显降低。结论:成功地构建了针对CaT1基因的siRNA载体,转染细胞后可抑制CaT1基因表达。

• 单位
  吉林大学; 吉林大学白求恩医学院