腺病毒介导S24F基因转染人脐静脉内皮细胞对调节活化正常T细胞表达和分泌因子趋化功能的影响

作者：孙永丰; 冯剑锷; 史嘉玮; 董念国

来源：中华实验外科杂志, 2014, 31(08): 1687-1689.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2014.08.026

• S24F基因
• 调节活化正常T细胞表达和分泌因子
• 腺病毒载体
• 基因转染

目的观察腺病毒介导S24F基因转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs)对调节活化正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)趋化作用的影响。方法构建pAV-MCMV/S24F-GFP-3FLAG(Ad-S24F)腺病毒载体,将不含目的基因的病毒载体pAV-MCMV-GFP(Ad-Null)为阴性对照组。分离培养HUVECs后分别转染Ad-S24F和Ad-Null,另设不含腺病毒培养基为空白对照。转染后采用荧光显微镜及Western blot检测重组蛋白表达。采用Transwell小室法分析S24F对RANTES趋化作用的影响。结果 Ad-S24F及Ad-Null构建成功,转染HUVECs后荧光显微镜及Western blot能检测到重组蛋白表达,Ad-S24F转染后能够抑制RANTES诱导的外周血单个核细胞(PBMCs)穿透内皮[Ad-S24F:(9.20±0.02)%;Ad-Null:(17.70±0.02)%;空白对照组(15.10±0.01)%]的趋化作用。结论腺病毒介导S24F基因转染HUVECs能够抑制RANTES的趋化作用。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院