miR-195靶向SALL4对胃癌细胞迁移侵袭及上皮间质转化的影响

作者：李英; 尹宁伟^*; 胡扬喜; 董星

来源：中华内分泌外科杂志, 2021, 15(06).

• miR-195
• 婆罗双树样基因4
• 胃癌细胞
• 迁移
• 侵袭
• 上皮间质化

目的探讨miR-195对人胃癌细胞(HGC-27)迁移、侵袭及上皮间质化(EMT)的影响及其作用机理。方法体外培养HGC-27细胞, 采用随机数字表法分为对照组、miR-195阴性对照(NC)组和miR-195模拟物(mimics)组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞miR-195及婆罗双树样基因4(SALL4)mRNA表达情况;显微镜下观察各组细胞形态学变化情况;蛋白印迹分析法检测各组HGC-27细胞SALL4蛋白及EMT相关蛋白上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)、神经性钙粘蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达情况;噻唑蓝(MTT)法检测各组HGC-27细胞存活率变化情况;划痕实验和侵袭实验(Transwell)检测各组HGC-27细胞迁移和侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证miR-195与SALL4的靶向关系。结果与对照组和miR-195 NC组相比, miR-195 mimics组HGC-27细胞miR-195表达水平[(0.97±0.05)vs(1.01±0.03)vs(2.68±0.07)]、细胞凋亡率[(0.21±0.03)% vs(0.17±0.05)vs(65.14±0.19)%]、E-cadherin蛋白表达水平[(0.23±0.02)vs(0.25±0.03)vs(0.97±0.04)]显著升高(P<0.05), 细胞存活率[(98.46±1.27)% vs(97.17±2.04)% vs(57.09±2.95)%]、划痕愈合率[(51.07±2.08)% vs(48.39±3.24)% vs(7.56±2.30)%]、侵袭数量[(108.53±20.54)vs(115.07±26.66)vs(28.37±10.44)]、SALL4 mRNA及SALL4、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平显著降低(P<0.05), HGC-27细胞形态恢复正常, 上皮间质化行为明显减轻;miR-195与SALL4 mRNA 3’’UTR区有结合位点, 与SALL4-3’’UTR-WT+miR-195 NC组比较, SALL4-3’’UTR-WT+miR-195 mimics组荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论 miR-195可能通过靶向抑制SALL4表达, 抑制人胃癌细胞的迁移、侵袭及上皮间质化行为。

• 单位
  郑州大学