脊髓灰质炎病毒Ⅲ型Sabin株C抗原和D抗原的分离及特性分析

作者：刘硕; 陈书辰; 喻刚; 曾智坤; 郝鹏亮; 郭长福; 王继麟^*; 陈晓琦^*

来源：中国生物制品学杂志, 2020, 33(04): 366-377.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003025

• 脊髓灰质炎病毒
• Sabin株
• C抗原
• D抗原
• 分离

目的分离脊髓灰质炎病毒Ⅲ型Sabin株(sPVⅢ)C抗原和D抗原,并分析其部分特性。方法采用CsCl密度梯度离心法分离sPVⅢ的C抗原和D抗原,电镜观察病毒形态;SDS-PAGE检测病毒结构蛋白组成;微量BCA法检测蛋白浓度,计算每种抗原所占比例;细胞病变法检测病毒滴度。同时检测上样浓度及超离次数对C抗原纯度的影响。结果 sPVⅢC抗原和D抗原在透射电镜下均呈球形,C抗原病毒颗粒密度较小,外壳大多较为松散,D抗原病毒颗粒密度较大,结构更稳固;C抗原由VP0、VP1、VP3蛋白组成,D抗原由VP1、VP2、VP3和VP4蛋白组成;C抗原和D抗原分别约占总蛋白含量的10%和90%,部分C抗原在分离前及分离过程中易产生聚集;D抗原的病毒滴度高于C抗原。降低上样浓度及进行二次超离可提高C抗原纯度。结论采用CsCl密度梯度离心法成功分离了sPVⅢ的C抗原和D抗原,C抗原滴度远低于D抗原,且部分易产生聚集,较难达到较高纯度。

• 单位
  武汉生物制品研究所有限责任公司; 黄冈市中心医院