二次酶消化法原代培养猪脂肪间充质干细胞

作者：马亚军; 焦智慧; 刘笑凝; 张千振; 王洪斌^*

来源：中国兽医学报, 2020, 40(11): 2200-2269.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.11.20

• 原代培养
• ADSCs
• 二次酶消化法
• 小型猪

为在一次原代培养过程中获得更多的小型猪脂肪间充质干细胞(adipose mesenchymal stem cells,ADSCs),为临床研究与应用提供更为充足的ADSCs来源,本试验对传统酶消化原代培养ADSCs的方法进行了改良。试验采用二次酶消化的方法将传统酶消化后未能完全消化的脂肪组织进行了二次酶消化,并将消化下来的ADSCs接种到培养瓶中,进行体外培养与鉴定。镜下观察ADSCs的生物学特性,CCK8法检测ADSCs的细胞增殖能力,对ADSCs进行成脂、成骨、成肝诱导分化鉴定,并利用流式细胞术对其表面标志物进行鉴定。结果显示,二次酶消化所得的ADSCs细胞形态正常,细胞增值能力良好,具有成脂、成骨、成肝分化能力,特异性表面标志物CD29、CD44、CD90的表达均在95.0%以上,呈强阳性表达,CD34表达在2.0%以下,呈阴性表达。结果表明,二次酶消化法可一次获得更多的ADSCs,提高了脂肪组织的利用率,是一种可行且高效的培养方法。

• 单位
  东北农业大学