海肾荧光素酶基因标记肝癌细胞生物发光成像在小鼠肝癌活体示踪中应用

作者：张丽娜; 李征然; 黄明声; 王劲; 郭若汨; 唐文杰

来源：中华肝脏外科手术学电子杂志, 2017, 6(06): 504-508.

DOI：10.3877/cma.j.issn.2095-3232.2017.06.019

• 癌,肝细胞
• 荧光抗体技术
• 生物发光成像
• 海肾荧光素酶

目的探讨海肾荧光素酶(Rluc)标记肝癌细胞生物发光成像在小鼠肝癌活体示踪中应用价值。方法构建Rluc基因标记的Rluc-GFP-Hepa1-6肝癌细胞,利用流式细胞仪分选GFP表达阳性的稳定细胞;Rluc-GFP-Hepa1-6细胞行细胞生物发光成像,分析生物发光信号强度与细胞数量间相关性;同时将Rluc-GFP-Hepa1-6细胞接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型,行活体生物发光成像,定量监测肿瘤细胞在体内的生长过程。发光信号强度与细胞数量及肿瘤体积间关系采用线性回归分析。结果成功构建Rluc-GFP-Hepa1-6细胞株,经流式细胞仪分选后获得GFP阳性率高达95%的Rluc-GFP-Hepa1-6细胞。细胞生物发光成像结果显示,Rluc-GFP-Hepa1-6细胞发光信号强度与细胞数量间有相关性(R2=0.999)。活体生物发光成像显示,皮下肿瘤的发光信号强度与肿瘤体积存在正相关性(R2=0.887)。结论应用Rluc生物发光成像可成功监测小鼠肝癌皮下肿瘤模型的演进过程,不仅为研究肝癌体内生长、转移、治疗提供了理想的模型,而且为进一步研究肝癌的治疗效果提供了良好、无创的定量示踪手段。

• 单位
  中山大学附属第三医院